微量分液儀操作注意事項(xiàng)
***、微量分液儀安全操作規(guī)范:規(guī)避人身與設(shè)備風(fēng)險(xiǎn)
個(gè)人防護(hù)
操作時(shí)佩戴實(shí)驗(yàn)服、護(hù)目鏡及防化學(xué)手套(如丁腈手套),防止試劑飛濺或泄漏接觸皮膚。
處理揮發(fā)性或腐蝕性液體(如甲醇、濃鹽酸)時(shí),需在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,并佩戴防毒面具。
防觸電與防爆
確保設(shè)備接地良好,避免在潮濕環(huán)境或手濕時(shí)插拔電源;若設(shè)備外殼帶電,立即斷電并聯(lián)系維修。
遠(yuǎn)離易燃易爆試劑(如乙醚、丙酮),分液區(qū)域禁止明火或靜電產(chǎn)生(如穿化纖衣物摩擦)。
生物安全防護(hù)
處理病原體或放射性樣本時(shí),需在生物安全柜內(nèi)操作,分液后對(duì)廢液和耗材進(jìn)行高壓滅菌或?qū)S锰幚怼?/p>
避免交叉污染:對(duì)不同樣本分液時(shí),更換吸頭或使用***次性分液頭,禁止重復(fù)使用未清洗的吸頭。
二、試劑與耗材管理:確保兼容性與穩(wěn)定性
試劑選擇與預(yù)處理
粘度適配:高粘度液體(如甘油、聚乙二醇)需提前加熱至室溫或稀釋,降低分液阻力;低粘度液體(如水、DMSO)可直接使用。
揮發(fā)性控制:對(duì)乙醇、乙腈等易揮發(fā)試劑,分液后立即密封容器,減少體積損失;建議使用低揮發(fā)替代試劑(如異丙醇代替乙醇)。
顆粒物過濾:含懸浮顆粒的試劑(如細(xì)胞培養(yǎng)基)需通過0.22μm濾膜過濾,防止吸頭或泵管堵塞。
耗材匹配與檢查
吸頭規(guī)格:根據(jù)分液體積選擇專用吸頭(如20μL、200μL、1000μL),避免混用導(dǎo)致漏液或精度下降。
容器適配性:96孔板需選擇平底或錐底設(shè)計(jì),確保液面檢測(cè)準(zhǔn)確;避免使用變形、破損或非標(biāo)準(zhǔn)容器(如自制玻璃管)。
耗材質(zhì)量:定期檢查吸頭、泵管等易損件的狀態(tài),及時(shí)更換老化或變形的耗材;泵管建議每3個(gè)月更換***次。
三、操作過程控制:優(yōu)化精度與效率
分液參數(shù)設(shè)置
速度控制:
吸液速度:高粘度液體選擇低速(如0.5mL/min),低粘度液體選擇高速(如2mL/min)。
分液速度:粘性液體降低速度至0.5mL/min,減少液滴掛壁;水性液體保持默認(rèn)速度(如1mL/min)。
體積范圍:避免在量程極限(如***小體積或***大體積)附近操作,建議選擇量程的20%-80%以提高精度。
分液模式選擇
單通道模式:適用于逐孔分液或梯度稀釋(如ELISA加樣),需手動(dòng)控制分液速度與間隔。
多通道模式:支持8/12/96通道同步分液,適配高通量場(chǎng)景(如藥物篩選),需預(yù)設(shè)分液序列并檢查孔位對(duì)齊。
自定義序列:通過軟件預(yù)設(shè)復(fù)雜分液流程(如多濃度加樣),需提前驗(yàn)證序列邏輯是否正確。
實(shí)時(shí)監(jiān)控與異常處理
屏幕顯示:關(guān)注當(dāng)前分液體積、剩余液量和進(jìn)度條,異常時(shí)設(shè)備自動(dòng)暫停并報(bào)警(如泵管堵塞、液面過低)。
常見問題處理:
分液量不足:檢查泵管是否老化、吸頭是否堵塞或液面是否過低。
液滴掛壁:調(diào)整分液速度或增加噴嘴高度(參考設(shè)備手冊(cè)推薦值)。
孔間交叉污染:增加清洗次數(shù)或更換***次性分液頭。
四、校準(zhǔn)與驗(yàn)證:保障數(shù)據(jù)可靠性
校準(zhǔn)周期與方法
日常校準(zhǔn):每周1次或更換試劑類型后需重新校準(zhǔn),使用與實(shí)驗(yàn)試劑粘度相近的液體(如水、DMSO)。
校準(zhǔn)方法:
重力法:通過分析天平稱量分液前后容器重量,計(jì)算實(shí)際體積(1mg≈1μL水)。
光電法:連接光電傳感器監(jiān)測(cè)液滴體積,適用于動(dòng)態(tài)分液場(chǎng)景(如連續(xù)分液96孔板)。
校準(zhǔn)記錄:建立校準(zhǔn)日志,包含校準(zhǔn)日期、設(shè)備型號(hào)、量程、方法、平均體積、CV、偏差、操作人等信息。
精度驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)
重復(fù)性驗(yàn)證:對(duì)同***孔連續(xù)分液10次,計(jì)算變異系數(shù)(CV),要求CV<1%(優(yōu)質(zhì)設(shè)備可達(dá)CV<0.5%)。
準(zhǔn)確性驗(yàn)證:使用標(biāo)準(zhǔn)移液器(如Eppendorf Research plus)對(duì)比分液結(jié)果,相對(duì)誤差(RE)需≤±1%(參考ASTM E1157標(biāo)準(zhǔn))。
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